Habarlar

Nature.com-a gireniňiz üçin sag boluň.Ulanylýan brauzer wersiýaňyzyň çäkli CSS goldawy bar.Iň oňat tejribe üçin täzelenen brauzeri ulanmagy maslahat berýäris (ýa-da Internet Explorer-de Gabat geliş tertibini öçüriň).Şol aralykda, dowamly goldawy üpjün etmek üçin sahypany stil we JavaScript bolmazdan hödürläris.
Fototerapiýanyň giňden ulanylmagy üçin täsirli fotosensilizatorlar aýratyn möhümdir.Şeýle-de bolsa, adaty fotosensilizatorlar, adatça, tolkun uzynlygynyň siňdirilmeginden, fotostabilligiň ýeterlik däldiginden, reaktiw kislorod görnüşleriniň (ROS) pes kwant öndürijiliginden we ROS-yň agregasiýasy bilen öçmeginden ejir çekýärler.Bu ýerde, suwly erginde Ru (II) -arene organometall toplumlarynyň öz-özüni ýygnamagy bilen araçylyk edilen ýakyn infragyzyl (NIR) supramolekulýar fotosensilizator (RuDA) habar berýäris.RuDA diňe jemlenen ýagdaýda ýeke kislorod (1O2) öndürip biler we ýeke-täk üç ulgamyň arasyndaky krossower prosesiniň ep-esli ýokarlanmagy sebäpli aç-açan jemlenen 1O2 nesil hereketini görkezýär.808 nm lazer çyrasynyň täsiri bilen, RuDA 1O2 kwant hasylyny 16,4% (FDA tarapyndan tassyklanan indokýanin ýaşyl: =Δ = 0,2%) we ýokary fotostermiki 24.2% (täjirçilik altyn nanorodlary) ýokary fototermiki öwrüliş netijeliligini görkezýär.: 21.0%, altyn nanoshelller: 13.0%).Mundan başga-da, oňat biokompatisiýa bolan RuDA-NP-ler, çiş ýerlerinde has köp ýygnanyp, fotodinamiki terapiýa wagtynda çişiň göwrüminiň 95,2% peselmegi bilen ep-esli çişiň döremegine sebäp bolup biler.Bu jemleýiş güýçlendiriji fotodinamiki terapiýa, amatly fotofiziki we fotohimiki aýratynlyklary bolan fotosensilizatorlary ösdürmegiň strategiýasyny üpjün edýär.
Adaty terapiýa bilen deňeşdirilende, fotodinamiki terapiýa (PDT) takyk spatiotemporal gözegçilik, invaziv däl, neşe serişdelerine az garşylyk we 1,2,3 täsirini azaltmak ýaly möhüm artykmaçlyklary sebäpli rak üçin özüne çekiji bejergidir.Lightagtylyk şöhlelenmesi astynda ulanylýan fotosensilizatorlar ýokary reaktiw kislorod görnüşlerini (ROS) emele getirip, apoptoz / nekroz ýa-da immun täsirine sebäp bolup biler4,5. Şeýle-de bolsa, hlorinler, porfirinler we antrakinonlar ýaly adaty fotosensilizatorlaryň köpüsi gysga tolkun uzynlygy (ýygylygy <680 nm) bolýar, şeýlelik bilen biologiki molekulalaryň (meselem, gemoglobin we melanin) güýçli siňdirilmegi sebäpli ýagtylygyň pes girmegine sebäp bolýar. görünýän sebit6,7. Şeýle-de bolsa, hlorinler, porfirinler we antrakinonlar ýaly adaty fotosensilizatorlaryň köpüsi gysga tolkun uzynlygy (ýygylygy <680 nm) bolýar, şeýlelik bilen biologiki molekulalaryň (meselem, gemoglobin we melanin) güýçli siňdirilmegi sebäpli ýagtylygyň pes girmegine sebäp bolýar. görünýän sebit6,7. Однако большинство обычных фотосенсибилизаторов, таких как хлорины, порфирины и антрахиноны, обладают относительно коротковолновым поглощением (частота < 680 нм), что приводит к плохому проникновению света из-за интенсивного поглощения биологических молекул (например, гемоглобина и меланина) в видимая область6,7. Şeýle-de bolsa, hlorlar, porfirinler we antrakinonlar ýaly iň köp ýaýran fotosensilizatorlar, tolkun uzynlygynyň siňdirilmegine (<680 nm) eýe bolup, görünýän sebite biologiki molekulalaryň (meselem, gemoglobin we melanin) güýçli siňdirilmegi sebäpli ýagtylygyň pes girmegine sebäp bolýar6,7.6 680 nm 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6 6导致 光 穿透性。。80 680 nm 6 6 680 nm） 6 6 6 6 6 6 6 6 6吸收 吸收 吸收 吸收 吸收 HI 导致 光 穿透性。。 Однако большинсто постнысибилизовов, таких как х аинины, порфирины һәм ант аининоны, имеют относительно порокколновое поглощение (частота <680 нм) из-за слного почом Şeýle-de bolsa, gemoglobin we melanin ýaly biomolekulalaryň güýçli siňdirilmegi sebäpli hlorlar, porfirinler we antrakinonlar ýaly adaty fotosensilizatorlaryň köpüsi gysga tolkun uzynlygyna siňdirilýär (ýygylyk <680 nm).Görünýän meýdan 6.7.Şonuň üçin 700–900 nm “bejeriş penjiresinde” işjeňleşdirilen ýakyn infragyzyl (NIR) fotosensilizatorlar fototerapiýa üçin örän amatlydyr.Infragyzyl şöhläniň golaýynda biologiki dokumalar iň az siňdirilýändigi sebäpli, çuňňur aralaşmagyna we az fotodamage sebäp bolup biler.
Gynansagam, bar bolan NIR-siňdiriji fotosensilizatorlar, adatça, fotostabilligi pes, ýekeje kislorod (1O2) öndüriji kuwwatyna we kliniki ulanylyşyny çäklendirýän jemleýji 1O2 söndürmäge eýe.Adaty fotosensilizatorlaryň fotofiziki we fotohimiki aýratynlyklaryny gowulandyrmak üçin köp tagallalar edilse-de, şu wagta çenli birnäçe habarda NIR siňdiriji fotosensilizatorlaryň bu meseleleriň hemmesini çözüp biljekdigi habar berildi.Mundan başga-da, birnäçe fotosensilizator 800 nm-den ýokary ýagtylyk bilen şöhlelenende 1O212,13,14 öndürijilikli wada berjekdigini görkezdi, sebäbi IR-iň ýakyn sebitinde foton energiýasy çalt azalýar.Elektron donor hökmünde Tripenilamin (TFA) we [1,2,5] tiadiazol- [3,4-i] dipirido [a, c] fenazin (TDP) elektron kabul ediji topar hökmünde Donor-kabul ediji (DA) görnüşi boýag berýär dar infragyzyl bioimaging II we fototermiki terapiýa (PTT) üçin giň zolakly infragyzyl siňdiriji boýaglar.Şeýlelik bilen, DA görnüşli boýaglar PDT üçin IR-e ýakyn tolgunma bilen ulanylyp bilner, ýöne PDT üçin fotosensilizator hökmünde seýrek öwrenilýär.
Fotosensilizatorlaryň ulgamara geçişiniň (ISC) ýokary netijeliliginiň 1O2 emele gelmegine kömek edýändigi mälimdir.ISC prosesini öňe sürmek üçin umumy strategiýa, agyr atomlary ýa-da ýörite organiki moietleri girizip, fotosensilizatorlaryň spin-orbit birikdirmesini (SOC) güýçlendirmekdir.Şeýle-de bolsa, bu çemeleşmäniň käbir kemçilikleri we çäklendirmeleri bar 19,20.Recentlyakynda, supramolekulýar öz-özüňi ýygnamak, fototerapiýada köp sanly artykmaçlygy bolan 21,22 molekulýar derejede işlemek üçin aşaky akylly çemeleşmäni üpjün etdi: (1) öz-özünden ýygnan fotosensilizatorlar lenta gurluşlaryny döretmek mümkinçiligine eýe bolup biler.Gurluş bloklarynyň arasyndaky orbitalaryň biri-birine gabat gelmegi sebäpli energiýa derejeleriniň has dykyz paýlanmagy bilen elektron gurluşlara meňzeýär.Şonuň üçin aşaky ýeketäk tolgundyryjy ýagdaý (S1) bilen goňşy üçlügiň tolgundyryjy ýagdaýynyň (Tn) arasyndaky energiýa oýny gowulaşar, bu ISC 23, 24 prosesi üçin peýdalydyr...Aboveokardaky artykmaçlyklary göz öňünde tutup, supramolekulýar fotosensilizator ulgamlarynyň PDT-iň kemçiliklerini ýeňip geçmek üçin geljegi uly alternatiwa bolup biljekdigine ynanýarys.
Ru (II) esasly toplumlar, özboluşly we özüne çekiji biologiki aýratynlyklary sebäpli keselleri anyklamakda we bejermekde mümkin bolan amaly platforma bolup durýar28,29,30,31,32,33,34.Mundan başga-da, tolgundyrylan ýagdaýlaryň köp bolmagy we Ru (II) esasly toplumlaryň sazlanyp bilinýän fotofiziki-himiki aýratynlyklary Ru (II) esasly fotosensilizatorlaryň ösmegi üçin uly artykmaçlyklary üpjün edýär35,36,37,38,39,40.Muňa görnükli mysal, häzirki wagtda II tapgyrda kliniki synaglarda, muskul däl invaziv öt haltasyny (NMIBC) 41 bejermek üçin fotosensilizator hökmünde işleýän TLD-1433 ruteniý (II) polipiridil toplumydyr.Mundan başga-da, rutenium (II) arene organometall toplumlary az zäherliligi we üýtgemegi aňsatlygy sebäpli rak keselini bejermek üçin himoterapewtiki serişde hökmünde giňden ulanylýar42,43,44,45.Ru (II) -arene organometall toplumlarynyň ion häsiýetleri diňe bir umumy erginlerde DA hromoforlarynyň pes erginini gowulaşdyrmak bilen çäklenmän, DA hromoforlarynyň ýygnanyşygyny hem gowulaşdyryp biler.Mundan başga-da, Ru (II) -arenesiň organometall toplumlarynyň pseudooctahedral ýarym sendwiç gurluşy, DA görnüşli hromoforlaryň H-agregasiýasynyň steriki öňüni alyp biler we şeýlelik bilen gyzyl reňkli siňdiriş zolaklary bilen J-agregasiýanyň döremegine kömek eder.Şeýle-de bolsa, pes durnuklylyk we / ýa-da bio elýeterliligi ýaly Ru (II) -arene toplumlarynyň mahsus kemçilikleri, bejeriş netijeliligine we arene-Ru (II) toplumlarynyň wivo işjeňligine täsir edip biler.Şeýle-de bolsa, gözlegler bu kemçilikleri ruteniý toplumlaryny biokompatif polimerler bilen fiziki encapsulýasiýa ýa-da kowalent konýugasiýa arkaly ýeňip boljakdygyny görkezdi.
Bu işde, DAD hromofory bilen Ru (II) -aren aralygyndaky koordinasiýa baglanyşygy arkaly NIR trigger bilen Ru (II) -arene (RuDA) DA-konýugasiýa toplumlaryny habar berýäris.Alnan toplumlar, kovalent däl täsirler sebäpli suwdaky metalosupramolekulýar vesikullara öz-özüni ýygnap biler.Ablyeri gelende aýtsak, supramolekulýar gurnama RuDA-a polimerizasiýa bilen örtülen ulgam ulgamy kesiş häsiýetleri berdi, bu PDC üçin örän amatly ISC netijeliligini ep-esli ýokarlandyrdy (1A surat).Ösümligiň ýygnanmagyny we wivo biokompativligini ýokarlandyrmak üçin, ýokary netijeli PDT / Dual- hökmünde hereket edýän RuDA-NP nanopartikullaryny (1B surat) döretmek üçin RuDA47,48,49 kodlamak üçin FDA tarapyndan tassyklanan Pluronic F127 (PEO-PPO-PEO) ulanyldy. tertibi PTT proksi.Rak fototerapiýasynda (1C surat), RuDA-NP ýalaňaç syçanlary MDA-MB-231 çişleri bilen bejermek üçin PDT we PTT-iň wivo-da täsirini öwrenmek üçin ulanyldy.
Rak keseliniň fototerapiýasy üçin monomer we jemlenen görnüşlerde RuDA-nyň fotofiziki mehanizminiň shematiki şekili, NIR işjeňleşdirilen PDT we PTT üçin B RuDA-NP we C RuDA-NP sintezi.
TPA we TDP işleýşinden ybarat RuDA goşmaça 1-nji suratda (2A surat) görkezilen tertipde taýýarlandy we RuDA 1H we 13C NMR spektrleri, elektrospraý ionlaşdyrma köpçülik spektrometri we elementar derňew (2-4-nji goşmaça suratlar) bilen häsiýetlendirildi. ).Iň pes ýeke geçişiň RuDA elektron dykyzlygy tapawudy kartasy, zarýad geçiriş prosesini öwrenmek üçin wagta bagly dykyzlyk funksiýa teoriýasy (TD-DFT) bilen hasaplandy.Goşmaça 5-nji suratda görkezilişi ýaly, elektronyň dykyzlygy esasan trifenilaminden TDP kabul ediji bölümine geçýär, bu adaty öýjükli zarýad geçirişine (CT) geçip biler.
Magdanyň himiki gurluşy. DMF we suwuň dürli gatnaşygyndaky garyndylarda magdanyň siňdiriş spektri.C RuDA (800 nm) we ICG (779 nm) kadalaşdyrylan siňdiriş bahalary, 808 nm lazer çyrasynyň 0,5 W sm-2 wagtyna garşy.D ABDA-nyň fotodegradasiýasy, tolkun uzynlygy 808 nm we güýji 0,5 W / sm2 bolan lazer şöhlelenmesiniň täsiri astynda dürli suw mazmuny bolan DMF / H2O garyndylarynda 1O2 emele gelmegi bilen görkezilýär.
Abstrakt - UV-de görünýän siňdiriş spektroskopiýasy, DMF we suwuň garyndylarynda magdanyň öz-özüni ýygnamak aýratynlyklaryny öwrenmek üçin ulanyldy.Injirde görkezilişi ýaly.2B, RuDA iň ýokary siňdiriş zolagy 729 nm bolan DMF-de 600-den 900 nm-e çenli siňdiriş zolaklaryny görkezýär.Suwuň mukdarynyň köpelmegi, magdanyň siňdirilişiniň maksimum 800 nm-e çenli gyzyl üýtgemegine getirdi, bu bolsa ýygnanan ulgamda magdanyň J-jemlenişini görkezýär.Dürli erginlerdäki RuDA-nyň fotoluminýensiýa spektri goşmaça 6-njy suratda görkezilýär. RuDA iň ýokary zyňyndy tolkun uzynlygy bilen adaty NIR-II ýagtylygyny görkezýär.CH2Cl2 we CH3OH degişlilikde 1050 nm.RuDA-nyň uly Stoks çalşygy (takmynan 300 nm) tolgundyrylan ýagdaýyň geometriýasynda we pes energiýa tolgunýan ýagdaýlaryň emele gelmegini görkezýär.CH2Cl2 we CH3OH-da magdanyň lýumensensiýa kwant hasyly degişlilikde 3,3 we 0,6% diýip kesgitlenildi.Şeýle-de bolsa, metanol bilen suwuň garyndysynda (5/95, v / v) zyňyndylaryň birneme üýtgemegi we kwant hasylynyň (0,22%) peselmegi hasaba alyndy, bu magdanyň öz-özüni ýygnamagy sebäpli bolup biler. .
ORE-iň öz-özüni ýygnamagyny göz öňüne getirmek üçin, suw goşandan soň metanol erginindäki ORE-de morfologiki üýtgemeleri göz öňüne getirmek üçin suwuk atom güýji mikroskopiýasyny (AFM) ulandyk.Suwuň düzümi 80% -den pes bolanda, takyk birleşme bolmady (Goşmaça 7-nji surat).Şeýle-de bolsa, suwuň mukdarynyň 90–95% -e çenli ýokarlanmagy bilen, magdanyň öz-özüni ýygnamagyny görkezýän kiçijik nanobölejikler peýda boldy. Mundan başga-da, tolkun uzynlygy 808 nm bolan lazer şöhlelenmesi RuDA-nyň suwda siňdiriş güýjüne täsir etmedi. çözgüdi (2-nji surat we goşmaça 8-nji surat).Munuň tersine, indokýaniniň ýaşyl (ICG gözegçilik hökmünde) siňdirilmegi 779 nm tizlikde peseldi, bu RuDA-nyň ajaýyp fotostabilligini görkezýär.Mundan başga-da, PBS-de (pH = 5.4, 7.4 we 9.0), 10% FBS we DMEM (ýokary glýukoza) RuDA-NP-leriň durnuklylygy dürli nokatlarda UV görünýän siňdiriş spektroskopiýasy tarapyndan barlandy.Goşmaça 9-njy suratda görkezilişi ýaly, RuDA-NP siňdiriş zolaklarynda azajyk üýtgeşmeler, pH 7.4 / 9.0, FBS we DMEM-de, RuDA-NP-iň ajaýyp durnuklylygyny görkezýär.Şeýle-de bolsa, kislotaly gurşawda (рН = 5.4) magdanyň gidrolizi tapyldy.Şeýle hem, ýokary öndürijilikli suwuk hromatografiýa (HPLC) usullaryny ulanyp, RuDA we RuDA-NP-iň durnuklylygyna baha berdik.Goşmaça 10-njy suratda görkezilişi ýaly, RuDA ilkinji sagatda metanol bilen suwuň (50/50, v / v) garyndysynda durnuklydy we 4 sagatdan soň gidroliz edildi.Şeýle-de bolsa, RuDA NP-leri üçin diňe giň konkaw-konweks pik syn edildi.Şonuň üçin geliň geçirijilik hromatografiýasy (GPC) RuDA NP-leriň PBS-de (pH = 7.4) durnuklylygyna baha bermek üçin ulanyldy.Goşmaça 11-nji suratda görkezilişi ýaly, synag şertlerinde 8 sagat inkubasiýa edilenden soň, NP RuDA-nyň iň beýikligi, pik ini we pik meýdany ep-esli üýtgemedi, bu NP RuDA-nyň ajaýyp durnuklylygyny görkezýär.Mundan başga-da, TEM şekilleri, suwuklandyrylan PBS buferinde (pH = 7.4, Goşmaça 12-nji surat) 24 sagatdan soň RuDA-NP nanobölejikleriniň morfologiýasynyň üýtgemän galandygyny görkezdi.
Öz-özüňi ýygnamak Ore dürli funksional we himiki aýratynlyklary berip bilýändigi sebäpli, metanol-suw garyndylarynda 9,10-antraseniýlbisiň (metilen) dimalon kislotasynyň (ABDA, görkeziji 1O2) çykmagyna syn etdik.Dürli suw düzümi bolan magdan50.2D-nji suratda we goşmaça 13-nji suratda görkezilişi ýaly, suwuň düzümi 20% -den pes bolanda ABDA-nyň peselmegi ýüze çykmady.Çyglylygyň 40% -e çenli ýokarlanmagy bilen ABDA-nyň zaýalanmagy ýüze çykdy, ABDA floresan intensiwliginiň peselmegi şaýatlyk edýär.Şeýle hem suwuň köp bolmagy, RuDA-nyň öz-özüni ýygnamagynyň ABDA zaýalanmagy üçin zerurdygyny we peýdalydygyny görkezýän has çalt zaýalanmagyna sebäp bolýar.Bu hadysa häzirki zaman ACQ (agregasiýa bilen öçürmek) hromoforlaryndan gaty tapawutlanýar.Tolkun uzynlygy 808 nm bolan lazer bilen şöhlelenende, 98% H2O / 2% DMF garyndysynda 1O2 RuDA-nyň kwant hasyly 16,4% bolup, ICG (ΦΔ = 0.2%) 51, 82 esse ýokarydyr, jemleniş ýagdaýynda ajaýyp nesil netijeliligini görkezmek 1O2 RuDA.
Netijede dörän görnüşleri kesgitlemek üçin 2,2,6,6-tetrametil-4-piperidinon (TEMP) we 5,5-dimetil-1-pirrolin N-oksidi (DMPO) ulanyp, elektron aýlanmalar ulanyldy; AFK.RuDA tarapyndanGoşmaça 14-nji suratda görkezilişi ýaly, 1O2-iň şöhlelenme wagtynda 0 bilen 4 minut arasynda emele gelýändigi tassyklandy.Mundan başga-da, RuDA şöhlelenme astynda DMPO bilen inkubasiýa edilende, gidroksil radikallaryň (OH ·) emele gelýändigini görkezýän adaty dört setirli EPR signaly 1: 2: 2: 1 DMPO-OH · goşundy tapyldy.Umuman aýdanyňda, ýokardaky netijeler goşa görnüşli I / II fotosensilizasiýa prosesi arkaly RuDA-nyň ROS önümçiligini höweslendirmek ukybyny görkezýär.
RuDA-nyň elektron häsiýetlerine monomer we jemlenen görnüşlere has gowy düşünmek üçin RuDA-nyň monomer we dimeriki görnüşlerdäki serhet molekulýar orbitalary DFT usuly bilen hasaplandy.Injirde görkezilişi ýaly.Monomeriki RuDA-nyň iň köp eýeleýän molekulýar orbital (HOMO) bag oňurgasynyň boýunda ýerleşýär we iň pes işlenmedik molekulýar orbital (LUMO) TDP kabul ediji bölüminde ýerleşýär.Munuň tersine, ölçegli HOMO-da elektron dykyzlygy bir RuDA molekulasynyň bagynda jemlenýär, LUMO-daky elektron dykyzlygy esasan başga bir RuDA molekulasynyň kabul ediji bölüminde jemlenýär, bu bolsa RuDA-nyň dimerdigini görkezýär.KT aýratynlyklary.
A HOMO we LUMO magdany monomer we dimeriki görnüşde hasaplanýar.B Monomerlerde we ölçeglerde magdanyň ýeke we üç derejeli energiýa derejesi.C RuDA-nyň çak edilýän derejeleri we mümkin bolan ISC kanallary monomer C we dimeriki D. Oklar mümkin ISC kanallaryny görkezýär.
Elektronlaryň we deşikleriň pes energiýaly ýeke-täk tolgundyryjy ýagdaýynda RuDA-nyň monomer we dimeriki görnüşlerde paýlanyşy, TD-DFT usuly bilen hasaplanan Multiwfn 3.852.53 programma üpjünçiligi arkaly derňeldi.Goşmaça bellikde görkezilişi ýaly.1-2-nji suratlardan görnüşi ýaly, monomeriki RDA deşikleri, esasan, bu tolgundyryjy ýagdaýlarda bagyň oňurgasy boýunça bölünýär, elektronlar bolsa esasan TDP toparynda ýerleşip, KT-iň içerki aýratynlyklaryny görkezýär.Mundan başga-da, bu tolgundyryjy ýagdaýlar üçin deşikler bilen elektronlaryň arasynda has köp gapma-garşylyk bar, bu ýeke-täk tolgundyryjy ýagdaýlaryň ýerli tolgunmalardan (LE) goşant goşýandygyny görkezýär.Ölçegler üçin, öýjükli KT we LE aýratynlyklaryndan başga-da, öýjükli KT aýratynlyklarynyň belli bir bölegi, esasanam, S3, S4, S7 we S8, öýjükli CT analizine esaslanyp, KT intermolekulýar geçişleri esasy hökmünde hasaba alyndy. (Goşmaça tablisa).3).
Synag netijelerine has gowy düşünmek üçin monomerler bilen ölçegleriň arasyndaky tapawutlary öwrenmek üçin RuDA tolgundyrylan döwletleriň häsiýetlerini has-da öwrendik (Goşmaça tablisa 4-5).3B-nji suratda görkezilişi ýaly, dimeriň ýeke we üç gezek tolgundyrylan ýagdaýlarynyň energiýa derejesi monomeriňkiden has dykyz, bu S1 bilen Tn arasyndaky energiýa boşlugyny azaltmaga kömek edýär. ISC geçişleriniň S1 bilen Tn54 arasynda kiçi energiýa boşlugynda (ΔES1-Tn <0.3 eV) amala aşyrylyp bilinjekdigi habar berildi. ISC geçişleriniň S1 bilen Tn54 aralygyndaky kiçijik energiýa boşlugynda (ΔES1-Tn <0.3 eV) amala aşyrylyp bilinjekdigi habar berildi. Сообщалось, что переходы ISC могут быть реадованя в пределах небольшой агегетической щели (ΔES1-Tn <0,3 эВ) между S1 и Tn54. ISC geçişleriniň S1 bilen Tn54 aralygyndaky kiçijik energiýa boşlugynda (ΔES1-Tn <0.3 eV) amala aşyrylyp bilinjekdigi habar berildi.据 报道 ， ISC 跃迁 可以 1 S1 和 Tn54 之间 的 小 能 Δ ΔES1-Tn <0.3 eV） 内 实现。据 报道 ， ISC 跃迁 可以 1 S1 和 Tn54 之间 的 小 能 Δ ΔES1-Tn <0.3 eV） 内 实现。 Сообщалось, что переход ISC может быть реадован в пределах небольшой заггетической щели (ΔES1-Tn <0,3 эВ) между S1 и Tn54. ISC geçişiniň S1 bilen Tn54 arasynda kiçi energiýa boşlugynda (ΔES1-Tn <0.3 eV) amala aşyrylyp bilinjekdigi habar berildi.Mundan başga-da, nol däl SOC integralyny üpjün etmek üçin diňe bir orbital, işleýän ýa-da işlenmedik, birleşdirilen ýeketäk we üç ştat boýunça tapawutlanmalydyr.Şeýlelik bilen, tolgundyryjy energiýanyň we orbital geçişiň derňewine esaslanyp, ISC geçişiniň ähli mümkin bolan kanallary Şekillerde görkezilýär.3C, D.Omereri gelende aýtsak, monomerde diňe bir ISC kanaly bar, dimeriki görnüşde ISC geçişini güýçlendirip biljek dört ISC kanaly bar.Şonuň üçin RuDA molekulalary näçe köp jemlense, ISC kanallary şonça-da elýeterli bolar diýip çaklamak ýerliklidir.Şol sebäpden, RuDA agregatlary S1 bilen elýeterli Tn arasyndaky energiýa boşlugyny azaldyp, 1O2 öndürilmegini ýeňilleşdirmek üçin ISC-iň netijeliligini ýokarlandyryp, üç we üç ştatda iki zolakly elektron gurluşlary emele getirip biler.
Esasy mehanizmi has-da düşündirmek üçin arena-Ru (II) toplumynyň (RuET) salgylanma birleşmesini sintez etdik, iki etil toparyny RuDA-da iki sany trifenilamin fenil topary bilen çalyşdyk (4A-njy surat, doly häsiýetlendirmek üçin ESI, Goşmaça 15 serediň) -21) Donordan (dietilamin) kabul edijiden (TDF), RuET, içerki öýjükli KT aýratynlyklaryna RuDA bilen deňdir.Garaşylyşy ýaly, DMF-de RuET-iň siňdiriş spektri 600–1100 nm sebitdäki ýakyn infragyzyl sebitde güýçli siňdiriş bilen pes energiýa zarýad geçirijisini görkezdi (4B-nji surat).Mundan başga-da, RuET agregasiýasy suwuň mukdarynyň köpelmegi bilen hem syn edildi, bu siňdiriş maksimumynyň üýtgemeginde şöhlelendi, bu suwuk AFM şekillendirişi bilen tassyklandy (Goşmaça 22-nji surat).Netijeler RuET, RuDA ýaly, öýjükli ýagdaýlary emele getirip we jemlenen gurluşlara öz-özüni ýygnap biljekdigini görkezýär.
RuET-iň himiki gurluşy.B DMF bilen suwuň dürli gatnaşygyndaky garyndylarda RuET-iň siňdiriş spektri.RuDA we RuET üçin C EIS Nyquist ýerleri.808 nm tolkun uzynlygy bilen lazer şöhlelenmesiniň täsiri astynda RuDA we RuET-iň fotokurrent jogaplary.
ABET-iň RuET-iň gatnaşmagynda fotodegrasiýa 808 nm tolkun uzynlygy bolan lazer bilen şöhlelenme bilen bahalandyryldy.Geň zat, dürli suw fraksiýalarynda ABDA-nyň peselmegi bolmady (Goşmaça 23-nji surat).Mümkin sebäbi, RuET zolakly elektron gurluşyny netijeli emele getirip bilmezligi sebäpli, etil zynjyry birek-birege zarýadlaryň netijeli geçirilmegini öňe sürmeýär.Şonuň üçin RuDA we RuET-iň fotoelektrohimiki aýratynlyklaryny deňeşdirmek üçin elektrokimiki impedans spektroskopiýasy (EIS) we wagtlaýyn fotokurrent ölçegleri geçirildi.Nyquist sýu plotetine (4C-nji surat) görä, RuDA RuET-den has kiçi radiusy görkezýär, bu bolsa RuDA56-yň birek-birekli elektron transportynyň we has gowy geçirijiliginiň bardygyny aňladýar.Mundan başga-da, RuDA-nyň fotokurrent dykyzlygy RuET57-den has ýokary zarýad geçiriş netijeliligini tassyklaýan RuET-den (4D-nji surat) has ýokarydyr.Şeýlelik bilen, Ore şäherindäki trifenilaminiň fenil topary, birek-birekli zarýadyň geçirilmegini üpjün etmekde we zolakly elektron gurluşyň emele gelmeginde möhüm rol oýnaýar.
Çişiň ýygnanmagyny we wivo biokompativligini ýokarlandyrmak üçin RuDA-ny F127 bilen hasam berkitdik.RuDA-NP-leriň ortaça gidrodinamiki diametri, geçirijiligini we saklanmagyny ýokarlandyryp, çişiň ýygnanmagyna kömek edýän dinamiki ýagtylygy dargatmak (DLS) usuly (5A surat) ulanyp, dar paýlanyş (PDI = 0.089) bilen 123.1 nm diýip kesgitlenildi.EPR) täsiri.TEM şekilleri, Ore NP-leriniň ortaça diametri 86 nm bolan birmeňzeş sferik görnüşiniň bardygyny görkezdi.Reri gelende aýtsak, RuDA-NP-leriň siňdiriş maksimumy 800 nm-de peýda boldy (Goşmaça 24-nji surat), bu RuDA-NP-leriň öz-özüni ýygnaýan RuDA-laryň funksiýalaryny we häsiýetlerini saklap biljekdigini görkezýär.NP magdany üçin hasaplanan ROS kwant hasyly 15,9% bolup, bu magdan bilen deňeşdirilýär. RuDA NP-leriň fototermiki häsiýetleri infragyzyl kameranyň kömegi bilen tolkun uzynlygy 808 nm bolan lazer radiasiýasynyň täsiri astynda öwrenildi.Injirde görkezilişi ýaly.5B, C, gözegçilik topary (diňe PBS) temperaturanyň birneme ýokarlanmagyny başdan geçirdi, RuDA-NPs ergininiň temperaturasy (ΔT) ýokarlanyp, 15.5, 26.1 we 43.0 ° C çenli ýokarlandy.Rokary konsentrasiýalar degişlilikde 25, 50 we 100 µM bolup, RuDA NP-leriň güýçli fototermiki täsirini görkezýär.Mundan başga-da, RuDA-NP fototermiki durnuklylygyny bahalandyrmak we ICG bilen deňeşdirmek üçin ýyladyş / sowadyş sikliniň ölçegleri geçirildi.Ore NP-leriniň temperaturasy bäş sany ýyladyş / sowadyş siklinden soň peselmedi (5D-nji surat), bu Ore NP-leriniň ajaýyp fototermiki durnuklylygyny görkezýär.Munuň tersine, ICG şol bir şertlerde fototermiki temperatura platosynyň ýitip gitmeginden görnüşi ýaly pes fototermiki durnuklylygy görkezýär.Öňki usul 58 boýunça RuDA-NP-iň fototermiki öwrüliş netijeliligi (PCE) 24.2% hasaplandy, bu altyn nanorodlar (21.0%) we altyn nanoshelller (13.0%) 59 ýaly bar bolan fototermiki materiallardan has ýokary.Şeýlelik bilen, NP Ore ajaýyp fototermiki häsiýetleri görkezýär, bu olary geljegi uly PTT agentlerine öwürýär.
RuDA NP-leriň DLS we TEM şekilleriniň derňewi.B 808 nm (0,5 W sm-2) tolkun uzynlygynda lazer şöhlelenmesine sezewar bolan RuDA NP-leriň dürli konsentrasiýalarynyň ýylylyk şekilleri.C mukdar maglumatlary bolan magdan NP-leriniň dürli konsentrasiýalarynyň fototermiki öwrüliş egrileri.B. D ORE NP we ICG-iň 5 ýyladyş-sowadyş sikliniň temperaturasynyň ýokarlanmagy.
RuDA NP-leriniň MDA-MB-231 adamyň döş mäziniň öýjüklerine garşy fotositotoksikligi vitroda baha berildi.Injirde görkezilişi ýaly.6A, B, RuDA-NPs we RuDA şöhlelenme bolmadyk ýagdaýynda ähmiýetsiz sitotoksiklik görkezdi, bu RuDA-NP we RuDA-nyň pes garaňky zäherliligini görkezýär.Şeýle-de bolsa, 808 nm tolkun uzynlygynda lazer şöhlelenmesine sezewar bolandan soň, RuDA we RuDA NP-ler, degişlilikde 5,4 we 9,4 μM IC50 bahasy bolan (iň ýokary inhibitasiýa konsentrasiýasy) MDA-MB-231 rak öýjüklerine garşy güýçli fotositotoksiklik görkezdiler. RuDA-NP we RuDA-nyň rak keseliniň fototerapiýasy üçin potensialynyň bardygyny.Mundan başga-da, RuDA-NP we RuDA-nyň fotositotoksikligi, ROS-yň arassalaýjy sitotoksikliginde ROS-nyň roluny düşündirmek üçin ROS arassalaýjy C witaminiň (Vc) barlygynda hasam derňeldi.Elbetde, Vc goşulandan soň öýjükleriň ýaşaýyş ukyplylygy ýokarlandy we RuDA we RuDA NP-leriň IC50 bahalary degişlilikde 25,7 we 40.0 MM boldy, bu bolsa ROS we RuDA NP-leriň fotositotoksikliginde ROS-nyň möhüm roluny subut edýär.MDA-MB-231 rak öýjüklerinde RuDA-NP-leriň we RuDA-nyň ýeňil täsir edýän sitotoksikligi, kalsin AM (janly öýjükler üçin ýaşyl floresan) we propidium ýod (PI, öli öýjükler üçin gyzyl floresan) ulanyp, janly / öli öýjük reňklemek arkaly.öýjükler tarapyndan tassyklanýar) floresan zondlar hökmünde.6C-nji suratda görkezilişi ýaly, RuDA-NP ýa-da RuDA bilen bejerilen öýjükler şöhlelenmezden ýaşap bilýärdi, güýçli ýaşyl floresan şaýatlyk edýär.Munuň tersine, lazer şöhlelenmesi astynda diňe RuDA ýa-da RuDA NP-leriň täsirli fotositotoksikligini tassyklaýan gyzyl floresan syn edildi.RuDA we RuDA NP-leriň fotositotoksikliliginiň bozulandygyny görkezýän Vc goşulanda ýaşyl floresensiýanyň peýda bolmagy bellärliklidir.Bu netijeler in vitro fotositotoksiklik barlaglaryna laýyk gelýär.
MDA-MB-231 öýjüklerdäki A RuDA- we B RuDA-NP öýjükleriniň dozalara baglylygy, degişlilikde Vc (0,5 mM) barlygynda ýa-da ýoklugynda.Roralňyşlyklar paneli, ortaça ± standart gyşarmak (n = 3). Jübütlenmedik, iki taraplaýyn t synaglary * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001. Jübütlenmedik, iki taraplaýyn t synaglary * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001. Непарные дву зононние t-критерии * p <0,05, ** p <0,01 и *** p <0,001. Jübütlenmedik iki guýrukly synaglar * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001.未 配对 的 双边 t 检验 * p <0.05 、 ** p <0.01 和 *** p <0,001。未 配对 的 双边 t 检验 * p <0.05 、 ** p <0.01 和 *** p <0,001。 Непарные дву зононние t-Тыы * p <0,05, ** p <0,01 и *** p <0,001. Jübütlenmedik iki guýrukly synaglar * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001.C Kalsin AM we propidium ýody floresan zond hökmünde ulanyp, janly / öli öýjükleriň boýag derňewi.Tereziniň çyzgysy: 30 µm.Her topardan üç sany biologiki gaýtalanmanyň şekilleri görkezilýär.D Dürli bejeriş şertlerinde MDA-MB-231 öýjüklerinde ROS önümçiliginiň konfokal floresan şekilleri.Greenaşyl DCF floresan ROS-yň bardygyny görkezýär.Tolkun uzynlygy 808 nm bolan lazer bilen 10 minut (300 J / cm2) 0,5 W / cm2 güýji bilen şöhlelendiriň.Tereziniň çyzgysy: 30 µm.Her topardan üç sany biologiki gaýtalanmanyň şekilleri görkezilýär.E Flow sitometri RuDA-NPs (50 µM) ýa-da 10 minutda Vc (0,5 mM) 808 nm lazer (0,5 W sm-2) bilen ýa-da bolmazdan RuDA (50 µM) bejeriş derňewi.Her topardan üç sany biologiki gaýtalanmanyň şekilleri görkezilýär.RuDA-NP (50 µM) bilen 808 nm lazer şöhlelenmesi bilen (0,5 W sm-2, 10 min, 300 J cm-2) bejerilen MDA-MB-231 öýjükleriň F Nrf-2, HSP70 we HO-1, öýjükleri aňladýar).Her topardan iki sany biologiki gaýtalanmanyň şekilleri görkezilýär.
MDA-MB-231 öýjüklerdäki öýjükli ROS önümçiligi 2,7-dihlorodihidrofluoressein diasetat (DCFH-DA) boýag usuly bilen barlandy.Injirde görkezilişi ýaly.6D, RuDA-NPs ýa-da RuDA bilen bejerilen öýjükler, 808 nm lazer bilen şöhlelenende aýratyn ýaşyl floresan görkezdi, bu RuDA-NP we RuDA-nyň ROS öndürmekde täsirli ukybynyň bardygyny görkezýär.Munuň tersine, ýagtylygyň ýoklugynda ýa-da Vc-iň ýoklugynda diňe ROS-yň birneme emele gelendigini görkezýän öýjükleriň gowşak floresan signaly syn edildi.RuDA-NP öýjüklerindäki öýjükli ROS derejeleri we RuDA bilen bejerilen MDA-MB-231 öýjükleri akym sitometriýasy bilen hasam kesgitlenildi.Goşmaça 25-nji suratda görkezilişi ýaly, 808 nm lazer şöhlelenmesi astynda RuDA-NP we RuDA tarapyndan döredilen ortaça floresan intensiwligi (MFI), gözegçilik topary bilen deňeşdirilende, AFK-nyň ajaýyp emele gelendigini tassyklaýan takmynan 5,1 we 4,8 esse ýokarlandy.kuwwaty.Şeýle-de bolsa, RuDA-NP ýa-da MDA-MB-231 öýjüklerdäki öýjükli ROS derejeleri, diňe konokok floresan derňewiniň netijelerine meňzeş lazer şöhlelenmesiz ýa-da Vc bar bolan gözegçilikler bilen deňeşdirilýärdi.
Mitokondriýanyň Ru (II) -arene toplumlarynyň esasy nyşanydygy görkezildi60.Şonuň üçin RuDA we RuDA-NP-leriň öýjükli lokalizasiýasy derňeldi.Goşmaça 26-njy suratda görkezilişi ýaly, RuDA we RuDA-NP mitokondriýada iň köp ýygnanan öýjükli paýlanyş profilini görkezýärler (degişlilikde 62,5 ± 4.3 we 60,4 ± 3,6 ng / mg belok).Şeýle-de bolsa, magdan we NP magdanynyň ýadro fraksiýalarynda diňe az mukdarda Ru tapyldy (degişlilikde 3,5 we 2.1%).Galan öýjük fraksiýasynda galyndy ruteni bar: RuDA üçin 31,7% (30,6 ± 3,4 ng / mg belok) we RuDA-NP-ler üçin 42,9% (47.2 ± 4,5 ng / mg belok).Umuman, magdan we NP magdany esasan mitokondriýada ýygnanýar.Mitokondrial disfunksiýany bahalandyrmak üçin degişlilikde mitokondrial membrananyň potensialyna we superoksid önümçiliginiň kuwwatyna baha bermek üçin JC-1 we MitoSOX Gyzyl boýag ulandyk.Goşmaça 27-nji suratda görkezilişi ýaly, 808 nm lazer şöhlelenmesi astynda RuDA we RuDA-NP bilen bejerilen öýjüklerde güýçli ýaşyl (JC-1) we gyzyl (MitoSOX Red) floresan syn edildi, bu hem RuDA bilen RuDA-NP-leriň ýokary floresan bolandygyny görkezýär Mitokondrial membrananyň depolýarlaşmagyna we superoksid önümçiligine täsirli itergi berip biler.Mundan başga-da, öýjük ölüminiň mehanizmi V-FITC / propidium ýod (PI) goşundy sitometriýasynyň seljermesi arkaly kesgitlenildi.6E-nji suratda görkezilişi ýaly, 808 nm lazer bilen şöhlelenende, RuDA we RuDA-NP, PBS ýa-da PBS goşmaça lazer bilen deňeşdirilende MDA-MB-231 öýjüklerinde irki apoptoz tizligini (aşaky sag kwadrant) ep-esli ýokarlandyrdy.gaýtadan işlenen öýjükler.Şeýle-de bolsa, Vc goşulanda, RuDA we RuDA-NP-iň apoptoz derejesi degişlilikde 50.9% we 52.0% -den 15,8% we 17,8% -e çenli ep-esli azaldy, bu ROS-nyň RuDA we RuDA-NP fotositotoksikliginde ROS-nyň möhüm roluny tassyklaýar..Mundan başga-da, synag edilen ähli toparlarda (ýokarky çep kwadrant) azajyk nekrotik öýjükler syn edildi, bu bolsa apoptozyň RuDA we RuDA-NP-ler tarapyndan döredilen öýjük ölüminiň esasy görnüşi bolup biljekdigini görkezýär.
Oksidleýji stresiň zeperlenmegi apoptozyň esasy kesgitleýjisi bolansoň, antioksidant ulgamynyň esasy sazlaýjysy bolan eritroid 2, faktor 2 (Nrf2) 62 bilen baglanyşykly ýadro faktory RuDA-NPs bejergisi bolan MDA-MB-231-de derňeldi.Şöhle bilen ýüze çykan RuDA NP-leriň hereket mehanizmi.Şol bir wagtyň özünde aşaky belok gem kislorod 1 (HO-1) aňlatmasy hem tapyldy.6F-nji suratda we goşmaça 29-njy suratda görkezilişi ýaly, RuDA-NP araçylyk fototerapiýa, PBS topary bilen deňeşdirilende Nrf2 we HO-1 aňlatma derejesini ýokarlandyrdy, bu RuDA-NP-leriň oksidleýji stres signalizasiýa ýollaryny höweslendirip biljekdigini görkezýär.Mundan başga-da, RuDA-NPs63-iň fototermiki täsirini öwrenmek üçin Hsp70 ýylylyk şok belogynyň aňlatmasy hem bahalandyryldy.RuDA-NPs + 808 nm lazer şöhlelenmesi bilen bejerilen öýjükleriň, gipertermiýa öýjükli reaksiýany görkezýän beýleki iki topara garanyňda Hsp70-iň artandygyny görkezýär.
In vitro netijeleri, MDA-MB-231 çişleri bilen ýalaňaç syçanlarda RuDA-NP-iň wivo öndürijiligini öwrenmäge itergi berdi.RuDA NP-leriň dokuma paýlanyşy bagyrda, ýürekde, dalakda, böwreklerde, öýkenlerde we çişlerde ruteniň düzümini kesgitlemek arkaly öwrenildi.Injirde görkezilişi ýaly.7A, adaty organlardaky magdan NP-leriniň iň ýokary mukdary ilkinji gözegçilik wagtynda (4 sagatda) peýda boldy, iň ýokary mazmun sanjymdan 8 sagat soň çiş dokumalarynda kesgitlenildi, ähtimal Ore NP-leri sebäpli.LF-iň EPR täsiri.Paýlaýyş netijelerine görä, NP magdany bilen bejerginiň iň amatly dowamlylygy administrasiýadan 8 sagat soň alyndy.RuDA-NP-leriň çiş ýerlerinde toplanmagyny görkezmek üçin, RuDA-NP-leriň fotoakustiki (PA) häsiýetleri sanjymdan soň dürli wagtlarda RuDA-NP-leriň PA signallaryny ýazga almak arkaly gözegçilik edildi.Ilki bilen, “RuDA-NP” -niň “PA” signaly, RuDA-NP içerki sanjymdan soň, çiş ýeriniň PA suratlaryny ýazga almak arkaly baha berildi.Goşmaça 30-njy suratda görkezilişi ýaly, RuDA-NP güýçli PA signalyny görkezdi we RuDA-NP konsentrasiýasy bilen PA signalyň intensiwliginiň arasynda oňyn arabaglanyşyk bardy (Goşmaça 30A surat).Soňra, “vivo PA” -da çiş ýerleriniň şekilleri, sanjymdan soň dürli wagt nokatlarynda RuDA we RuDA-NP damar sanjymyndan soň ýazga alyndy.7B-nji suratda görkezilişi ýaly, çiş ýerinden RuDA-NP-leriň PA signaly wagtyň geçmegi bilen kem-kemden köpeldi we sanjymdan soňky 8 sagatda platoda ýetdi, ICP-MS derňewi bilen kesgitlenen dokumalaryň paýlanyş netijelerine laýyk gelýär.RuDA (goşmaça 30B surat) barada aýdylanda, iň ýokary PA signalynyň intensiwligi sanjymdan 4 sagat soň peýda boldy, bu RuDA-nyň çişe çalt girýändigini görkezýär.Mundan başga-da, RuDA we RuDA-NP-leriň çykaryş häsiýeti, ICP-MS ulanyp, peşewdäki we nejisdäki ruteniniň mukdaryny kesgitlemek arkaly derňeldi.RuDA (Goşmaça 31-nji surat) we RuDA-NP-ler (7-nji surat) ýok etmegiň esasy ugry zyňdan geçýär we RuDA we RuDA-NP-leriň täsirli arassalanylyşy 8 günlük okuw döwründe geçirildi, bu bolsa RuDA diýmekdir we RuDA-NP-ler uzak wagtlap zäherlenmezden bedenden netijeli ýok edilip bilner.
A. Syçan dokumalarynda RuDA-NP-iň öňki wivo paýlanyşy, sanjymdan soň dürli wagtlarda Ru mazmuny (dokumanyň her gramyna Ru (ID) mukdary) bilen kesgitlenildi.Maglumatlar ortaça ± standart gyşarmak (n = 3). Jübütlenmedik, iki taraplaýyn t synaglary * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001. Jübütlenmedik, iki taraplaýyn t synaglary * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001. Непарные дву зононние t-критерии * p <0,05, ** p <0,01 и *** p <0,001. Jübütlenmedik iki guýrukly synaglar * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001.未 配对 的 双边 t 检验 * p <0.05 、 ** p <0.01 和 *** p <0,001。未 配对 的 双边 t 检验 * p <0.05 、 ** p <0.01 和 *** p <0,001。 Непарные дву зононние t-Тыы * p <0,05, ** p <0,01 и *** p <0,001. Jübütlenmedik iki guýrukly synaglar * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001.B PA dürli wagt nokatlarynda RuDA-NP-leriň (10 µmol kg-1) damar içegesinden soň 808 nm tolgundyryjy wivo çiş ýerleriniň şekilleri.RuDA NP-leriň (10 µmol kg-1) damar içilmeginden soň, C Ru dürli wagt aralygynda peşew we zaýa bilen syçanlardan çykaryldy.Maglumatlar ortaça ± standart gyşarmak (n = 3).
RuDA-NP-iň ýyladyş kuwwaty deňeşdirmek üçin MDA-MB-231 we RuDA çişleri bilen ýalaňaç syçanlarda öwrenildi.Injirde görkezilişi ýaly.8A we goşmaça 32-nji surat, gözegçilik (şor) topary 10 minut üznüksiz täsir edenden soň az temperatura üýtgemesini (ΔT ≈ 3 ° C) görkezdi.Şeýle-de bolsa, RuDA-NP-leriň we RuDA-nyň temperaturasy iň ýokary temperatura degişlilikde 55,2 we 49,9 ° C bilen çalt ýokarlandy we wivo rak bejergisinde ýeterlik gipertermi üpjün etdi.RuDA NP-leriniň (ΔT ≈ 24 ° C) RuDA (ΔT ≈ 19 ° C) bilen deňeşdirilende ýokary temperaturanyň ýokarlanmagy, EPR täsiri sebäpli has oňat geçirijiligi we çiş dokumalarynda toplanmagy sebäpli bolup biler.
MDA-MB-231 çişli syçanlaryň infragyzyl termiki şekilleri, sanjymdan 8 sagat soň dürli wagtlarda 808 nm lazer bilen şöhlelenýär.Her topardan dört biologiki gaýtalanmanyň şekilleri görkezilýär.B Otnositel çişiň göwrümi we C Bejergi wagtynda syçanlaryň dürli toparlarynyň ortaça çiş massasy.D Syçanlaryň dürli toparlarynyň beden agramlarynyň egrileri.Tolkun uzynlygy 808 nm bolan lazer bilen 10 minut (300 J / cm2) 0,5 W / cm2 güýji bilen şöhlelendiriň.Roralňyşlyklar paneli, ortaça ± standart gyşarmak (n = 3). Jübütlenmedik, iki taraplaýyn t synaglary * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001. Jübütlenmedik, iki taraplaýyn t synaglary * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001. Непарные дву зононние t-критерии * p <0,05, ** p <0,01 и *** p <0,001. Jübütlenmedik iki guýrukly synaglar * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001.未 配对 的 双边 t 检验 * p <0.05 、 ** p <0.01 和 *** p <0,001。未 配对 的 双边 t 检验 * p <0.05 、 ** p <0.01 和 *** p <0,001。 Непарные дву зононние t-Тыы * p <0,05, ** p <0,01 и *** p <0,001. Jübütlenmedik iki guýrukly synaglar * p <0.05, ** p <0.01, we *** p <0,001. E H&E, Saline, Saline + Lazer, RuDA, RuDA + Lazer, RuDA-NPs we RuDA-NPs + Lazer toparlary ýaly dürli bejeriş toparlaryndan esasy organlaryň we çişleriň boýag şekilleri. E H&E, Saline, Saline + Lazer, RuDA, RuDA + Lazer, RuDA-NPs we RuDA-NPs + Lazer toparlary ýaly dürli bejeriş toparlaryndan esasy organlaryň we çişleriň boýag şekilleri. Изображения Окрашивания E H&E основных шаров һәм опухола из из разных группасы лечения, включая группы физиологического раствора, физиологического раствора + лазера, RuDA, RuDA + Laser, RuDA-NPs we RuDA-NPs Dürli bejeriş toparlaryndan, şol sanda duzly, duzly + lazer, RuDA, RuDA + lazer, RuDA-NP we RuDA-NPs + lazer toparlary ýaly esasy organlaryň we çişleriň boýag şekilleri.来自 不同 治疗 H H H H H H H H H DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DAH 不同 治疗 H H H H H&E Окрашивание E H&E основных чировов һәм опухолей из различных группа лечения, включая физиологический раствор, физиологический раствор + лазер, RuDA, RuDA + лазер, RuDA-NPs we RuDA-NPs + лазер. Dürli bejeriş toparlaryndan duzly, duzly + lazer, RuDA, RuDA + lazer, RuDA-NPs we RuDA-NPs + lazer ýaly esasy organlaryň we çişleriň E H&E boýagy.Tereziniň çyzgysy: 60 µm.
RuDA we RuDA NP-leri bilen fototerapiýanyň täsiri, MDA-MB-231 çişli ýalaňaç syçanlaryň, RuDA ýa-da RuDA NP-leri bir dozada guýruk damaryndan 10.0 µmol kg-1 sanjymyna, soň bolsa 8-e baha berildi. sanjymdan birnäçe sagat soň.808 nm tolkun uzynlygy bilen lazer şöhlelenmesi.8B-nji suratda görkezilişi ýaly, şor we lazer toparlarynda çişiň mukdary ep-esli ýokarlandy, şor ýa-da lazer 808 şöhlelenmesiniň çişiň ösmegine az täsir edendigini görkezýär.Duzly toparda bolşy ýaly, lazer şöhlelenmesi bolmadyk ýagdaýynda RuDA-NP ýa-da RuDA bilen bejerilen syçanlarda çalt çişiň ösmegi hem pes garaňky zäherliligini görkezýär.Munuň tersine, lazer şöhlelenmesinden soň, RuDA-NP we RuDA bejergisi, duzly bejeriş topary bilen deňeşdirilende, çişiň mukdary 95,2% we 84.3% peselmegi bilen ep-esli çiş regressiýasyna sebäp boldy, ajaýyp synergistik PDT görkezýär., RuDA / CHTV täsiri bilen araçylyk edilýär.- NP ýa-da Ore. RuDA bilen deňeşdirilende, RuDA NP-ler has gowy fototerapewtiki effekt görkezdi, bu esasan RuDA NP-leriň EPR täsiri bilen baglanyşyklydy.Çişiň ösmeginiň öňüni alyş netijeleri, bejerginiň 15-nji gününde aksizlenen çişiň agramy bilen bahalandyryldy (8C-nji surat we goşmaça 33-nji surat).RuDA-NP bejergisi bolan syçanlar we RuDA bejerilen syçanlardaky ortaça çiş massasy degişlilikde 0,08 we 0,27 g boldy, bu gözegçilik toparyna garanyňda has ýeňil (1,43 g).
Mundan başga-da, RuDA-NP ýa-da RuDA-nyň wivo-de garaňky zäherliligini öwrenmek üçin syçanlaryň beden agramy her üç günden hasaba alyndy.8D-nji suratda görkezilişi ýaly, ähli bejeriş toparlary üçin beden agramynda düýpli tapawutlar bolmady. Mundan başga-da, dürli bejeriş toparlaryndan esasy organlaryň (ýürek, bagyr, dalak, öýken we böwrek) gematoksilin we eozin (H&E) boýagy geçirildi. Mundan başga-da, dürli bejeriş toparlaryndan esasy organlaryň (ýürek, bagyr, dalak, öýken we böwrek) gematoksilin we eozin (H&E) boýagy geçirildi. Кроме того, было проведено окрашивание гемат осином и эозином (H&E) основных чанов (сердца, печенчени, селезенки, легких һәм по по) из разных групп лечения. Mundan başga-da, dürli bejeriş toparlaryndan esasy organlaryň (ýürek, bagyr, dalak, öýken we böwrek) gematoksilin we eozin (H&E) boýagy geçirildi.(H&E) H。 H H H H H H H H H H H H H H H H H H (H&E) Кроме того, про проилиили окрашивание гемат осилином и эозином (H&E) основных адовов (сердца, печенчени, селезенки, легких и по ") различных группах лечения. Mundan başga-da, dürli bejeriş toparlarynda esasy organlaryň (ýürek, bagyr, dalak, öýken we böwrek) gematoksilin we eozin (H&E) boýagy geçirildi.Suratda görkezilişi ýaly.8E, RuDA-NP we RuDA toparlaryndan bäş sany esasy organyň H&E reňkli şekilleri, hiç hili näsazlygy ýa-da organ zeperini görkezmeýär. 8E, RuDA-NP we RuDA toparlaryndan bäş sany esasy organyň H&E reňkli şekilleri, hiç hili näsazlygy ýa-da organ zeperini görkezmeýär.Injirde görkezilişi ýaly.8E, изображения окрашивания H&E пяти основных човов из группа RuDA-NPs we RuDA не демонстрируют явных аномалий или повреждений сиов. RuDA-NP we RuDA toparlaryndan bäş sany esasy organyň 8E, H&E reňkli şekilleri, organlaryň näsazlyklaryny ýa-da şikeslerini görkezmeýär.如图 8E 所示 ， 来自 RuDA-NPs 和 RuDA 组 的 五个 & & H&E 染色 图像 没有 显示 出。。。。& 8E 所示 ， 来自 RuDA-NPs 和 RuDA 组 的 五个 主要 & 的 H&E Как показано на рисунке 8E, изображения Окрашивания H&E пяти основных адов из группа RuDA-NPs һәм RuDA не показали явных аномалий или повреждения чаров. 8E-nji suratda görkezilişi ýaly, RuDA-NP we RuDA toparlaryndan bäş sany esasy organyň H&E boýag şekilleri hiç hili bidüzgünçilik ýa-da organ zeper ýetmedi.Bu netijeler, ne RuDA-NP, ne-de RuDA wivo-da zäherlenmäniň alamatlaryny görkezmedi. Mundan başga-da, çişleriň H&E reňkli şekilleri, RuDA + lazer we RuDA-NPs + lazer toparlarynyň, RuDA we RuDA-NP-leriň wivo fototerapewtiki täsirliligini görkezip, düwnük öýjükleriniň agyr ýok edilmegine sebäp bolup biljekdigini görkezdi. Mundan başga-da, çişleriň H&E reňkli şekilleri, RuDA + lazer we RuDA-NPs + lazer toparlarynyň, RuDA we RuDA-NP-leriň wivo fototerapewtiki täsirliligini görkezip, düwnük öýjükleriniň agyr ýok edilmegine sebäp bolup biljekdigini görkezdi.Mundan başga-da, gematoksilin-eozin reňkli çiş şekilleri, RuDA + lazer we RuDA-NPs + lazer toparlarynyň, wivo-da RuDA we RuDA-NP-leriň ýokary fototerapewtiki netijeliligini görkezip, rak öýjükleriniň agyr ýok edilmegine sebäp bolup biljekdigini görkezdi.A ， 肿瘤 & H&E 染色 图像 ， RuDA + lazer 和 RuDA-NPs + lazer 组 均可 导致 严重 了 了 了 DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA DA。。。此外 ， 肿瘤 的 & e 染色 ， ruda + lazer 和 ruda-nps + lazer 组 均 了 了 da da da da da da da da da da da da da da da da da da 。。。。。。。。。。。。。 。。。Mundan başga-da, gematoksilin we eozin reňkli çiş şekilleri RuDA + lazer we RuDA-NPs + lazer toparlarynyň hem rak keseliniň agyr ýok edilmegine sebäp bolandygyny, RuDA we RuDA-NP-leriň ýokary fototerapewtiki netijeliligini görkezdi.
Sözümiň ahyrynda, DA görnüşli baglar bilen Ru (II) -arene (RuDA) organometall toplumy, jemleýiş usuly bilen ISC işini ýeňilleşdirmek üçin döredildi.Sintezlenen RuDA, kovalent däl täsirleşmeler arkaly öz-özüni ýygnap, RuDA-dan alnan supramolekulýar ulgamlary emele getirip biler, şeýlelik bilen 1O2 emele gelmegini we ýeňil döreýän rak bejergisi üçin netijeli fototermiki öwrülişigi ýeňilleşdirer.Monomeriki RuDA-nyň 808 nm lazer şöhlelenmesi astynda 1O2 öndürmändigi, ýöne dizaýnymyzyň rasionaldygyny we netijeliligini görkezip, jemlenen ýagdaýda köp mukdarda 1O2 öndürip biljekdigi bellärliklidir.Soňky gözlegler, supramolekulýar ýygnagyň RuDA-a PDT we PTT gaýtadan işlemek üçin gaty islenýän gyzyl siňdiriş we fotobleaching garşylygy ýaly gowulaşan fotofiziki we fotohimiki häsiýetleri berýändigini görkezdi.In vitro we in vivo synaglary, oňat biokompatisiýa we çişde gowy ýygnanmagy bolan RuDA NP-leriň 808 nm tolkun uzynlygynda lazer şöhlelenmesinde ajaýyp yşyklandyryjy antikanser işjeňligini görkezýändigini görkezdi.Şeýlelik bilen, RuDA NP-leri bimodal supramolekulýar PDT / PTW reagentleri hökmünde 800 nm-den ýokary tolkun uzynlyklarynda işjeňleşdirilen fotosensilizatorlar toplumyny baýlaşdyrar.Supramolekulýar ulgamyň konseptual dizaýny, ajaýyp fotosensilleşdiriji effektleri bolan NIR-işjeňleşdirilen fotosensilizatorlar üçin täsirli ugry üpjün edýär.
Chemicalhli himiki maddalar we erginler täjirçilik üpjün edijilerden alyndy we has arassalanmazdan ulanyldy.RuCl3, Boren Precious Metals Co., Ltd. (Kunming, Hytaý) satyn alyndy.[(η6-p-cym) Ru (fendio) Cl] Cl (fendio = 1,10-fenantrolin-5,6-dion) we 4,7-bis [4- (N, N-difenilamin) fenil] -5 , 6-Diamino-2,1,3-benzothiadiazol öňki gözleglere görä 64,65 sintez edildi.NMR spektrleri, Bruker Avance III-HD 600 MGs spektrometrde günorta-gündogar uniwersitetiniň seljeriş synag merkezinde d6-DMSO ýa-da CDCl3 çözüji hökmünde ýazga alyndy.Himiki çalşyklar p ppm-de berilýär.tetrametilsilana we özara täsir üýtgemelerine J gertsde mutlak bahalarda berilýär.Agilent 6224 ESI / TOF MS guralynda ýokary çözgütli köpçülik spektrometri (HRMS) ýerine ýetirildi.C, H we N elementar derňewi Vario MICROCHNOS elementar analizatorynda (Elementar) geçirildi.UV görünýän spektrler Şimadzu UV3600 spektrofotometrde ölçenildi.Floresan spektrleri Şimadzu RF-6000 spektroflorimetrinde ýazga alyndy.EPR spektrleri Bruker EMXmicro-6/1 guralynda ýazga alyndy.Taýýarlanan nusgalaryň morfologiýasy we gurluşy 200 kW naprýa ateniýede işleýän FEI Tecnai G20 (TEM) we Bruker Icon (AFM) gurallarynda öwrenildi.Nanobrook Omni analizatorynda (Brukhawen) dinamiki ýagtylygyň ýaýramagy (DLS) geçirildi.Fotoelektrohimiýa aýratynlyklary elektrokimiki gurnama bilen ölçeldi (CHI-660, Hytaý).Fotoakustiki suratlar FUJIFILM VisualSonics Vevo® LAZR ulgamy arkaly alyndy.Konfokal şekiller, Olympus FV3000 konokok mikroskopy arkaly alyndy.FACS derňewi BD Calibur akym sitometrinde geçirildi.8okary öndürijilikli suwuk hromatografiýa (HPLC) synaglary 2489 UV / Vis detektoryny ulanyp, Waters Alliance e2695 ulgamynda geçirildi.Gel permeasiýa hromatografiýasy (GPC) synaglary, ERC RefratoMax520 refraktiw indeks detektoryny ulanyp, Termo ULTIMATE 3000 guralynda ýazga alyndy.
[(η6-p-cym) Ru (fendio) Cl] Cl (fendio = 1,10-fenantrolin-5,6-dion) 64 (481.0 mg, 1,0 mmol), 4,7-bis [4 - (N, N-difenilamino) fenil] -5,6-diamino-2,1,3-benzotiadiazol 65 (652.0 mg, 1,0 mmol) we buzly sirke kislotasy (30 ml) refleks sowadyjyda 12 sagat garyndy.Soňra çözüji aýlaw bugaryjy ulanyp wakuoda aýryldy.Alnan galyndy RuDA-ny ýaşyl poroşok (hasyl: 877.5 mg, 80%) almak üçin fleş sütün hromatografiýasy (silisiýa jeli, CH2Cl2: MeOH = 20: 1) bilen arassalandy.anus.C64H48Cl2N8RuS üçin hasaplanýar: C 67.84, H 4.27, N 9.89.Tapyldy: C 67.92, H 4.26, N 9.82.1H NMR (600 MGts, d6-DMSO) δ 10.04 (s, 2H), 8.98 (s, 2H), 8.15 (s, 2H), 7.79 (s, 4H), 7.44 (s, 8H), 7.21 (d, J = 31.2 Hz, 16H), 6.47 (s, 2H), 6.24 (s, 2H), 2.69 (s, 1H), 2 .25 (s, 3H), 0.99 (s, 6H).13c nmr (150 MHZ, D6-DMSO), δ (PPM) 158.03, 152.81, 149.31, 147.98, 147.16, 139.98, 136.21, 135.57, 134.68, 130.34, 130.02, 128.68, 128.01, 125.51, 124.45, 120.81, 103.45 , 103., 86.52, 84,75, 63.29, 30.90, 22.29, 18.83.ESI-MS: m / z [M-Cl] + = 1097,25.
4,7-bis [4- (N, N-dietilamino) fenil-5,6-diamino-2,1,3-benzotiadiazol (L2) sintezi: L2 iki ädimde sintez edildi.Pd (PPh3) 4 (46 mg, 0.040 mmol) N, N-dietil-4- (tributylstannyl) aniline (1,05 g, 2,4 mmol) we 4,7-dibromo-5,6-dinitro ergini - 2, Gury toluende (100 ml) 1,3-benzotiadiazol (0,38 g, 1,0 mmol).Garyndy 100 ° C-de 24 sagat garyndy.Wakuoda tolueni aýyrandan soň, emele gelen gaty nebit efir bilen ýuwuldy.Soňra bu birleşmäniň (234.0 mg, 0,45 mmol) we demir poroşokyň (0,30 g, 5,4 mmol) sirke kislotasynda (20 ml) garyndysy 80 ° C-de 4 sagat garyndy.Reaksiýa garyndysy suwa guýuldy we emele gelen goňur gaty süzgüç bilen ýygnaldy.Önüm ýaşyl gaty (126.2 mg, 57% hasyl) bermek üçin wakuum sublimasiýa bilen iki gezek arassalandy.anus.C26H32N6S üçin hasaplanýar: C 67.79, H 7.00, N 18.24.Tapyldy: C 67.84, H 6.95, H 18.16.1H NMR (600 MGts, CDCl3), δ (ppm) 7.42 (d, 4H), 6.84 (d, 4H), 4.09 (s, 4H), 3.42 (d, 8H), 1.22 (s, 12H).13С NMR (150 MGts, CDCl3), δ (ppm) 151.77, 147.39, 138.07, 131.20, 121.09, 113.84, 111.90, 44.34, 12.77.ESI-MS: m / z [M + H] + = 461.24.
Birleşmeler RuDA meňzeş proseduralardan taýýarlandy we arassalandy.anus.C48H48Cl2N8RuS üçin hasaplanýar: C 61.27, H 5.14, N 11.91.Tapyldy: C, 61.32, H, 5.12, N, 11.81,1H NMR (600 MGts, d6-DMSO), δ (ppm) 10.19 (s, 2H), 9.28 (s, 2H), 8.09 (s, 2H), 7.95 (s, 4H), 6.93 (s, 4H), 6.48 (d, 2H), 6.34 (s, 2H), 3.54 (t, 8H), 2.80 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 1.31 (t, 12H), 1.07 (s, 6H).13c nmr (151 mhz, CDCL3), δ (PPM) 158.20, 153.36, 148.82, 148.14, 138.59, 136.79, 135.75, 134.71, 130.44, 128.87, 128.35, 121.70, 111.84, 110.76, 105.07, 104.23, 84.23, 38.06, 31.22, 29.69, 22.29, 19.19, 14.98, 12.93.ESI-MS: m / z [M-Cl] + = 905.24.
RuDA MeOH / H2O (5/95, v / v) 10 MM konsentrasiýasynda eritildi.RuDA-nyň siňdiriş spektri, tolkun uzynlygy 808 nm (0,5 W / cm2) bolan lazer çyrasy bilen şöhlelenme astynda Şimadzu UV-3600 spektrofotometrde her 5 minutda ölçelýärdi.ICG spektrleri standart bilen deň şertlerde ýazga alyndy.
EPR spektrleri 20 mWt mikrotolkun güýji, skaner aralygy 100 G we 1 G. 2,2,6,6-tetrametil-4-piperidon bilen Bruker EMXmicro-6/1 spektrometrinde ýazga alyndy. (TEMP) we 5,5-dimetil-1-pirrolin N-oksidi (DMPO) aýlaw duzaklary hökmünde ulanyldy.Elektron aýlaw rezonans spektri, tolkun uzynlygy 808 nm (0,5 W / cm2) bolan lazer şöhlelenmesiniň täsiri astynda RuDA (50 µM) we TEMF (20 mM) ýa-da DMPO (20 mM) garyşyk erginler üçin ýazga alyndy.
RuDA üçin DFT we TD-DFT hasaplamalary, 1666,67,68 Gauss programmasyny ulanyp, suwly erginde PBE1PBE / 6–31 G * // LanL2DZ derejesinde geçirildi.GaussView programmasy (5.0 wersiýa) arkaly pes energiýaly tolgundyryjy RuDA-nyň HOMO-LUMO, deşik we elektron paýlanyşy meýilleşdirildi.
Ilki bilen ICG (=Δ = 0.002) bilen adaty UV görünýän spektroskopiýa ulanyp, 1O2 RuDA öndürmegiň netijeliligini ölçemäge synanyşdyk, ýöne ICG-iň fotodegradasiýasy netijelere güýçli täsir etdi.Şeýlelik bilen, 1O2 RuDA-nyň kwant hasyly, tolkun uzynlygy 808 nm (0,5 W / sm2) bolan lazer bilen şöhlelenende takmynan 428 nm ABDA floresan intensiwliginiň üýtgemegini kesgitlemek bilen ölçenildi.Synaglar RuDA we RuDA NP-lerinde (20 μM) suwda / DMF (98/2, v / v) ABDA (50 μM) öz içine alýar.1O2 kwant hasyly aşakdaky formula bilen hasaplandy: ΦΔ (PS) = ΦΔ (ICG) × (rFS / APS) / (rICG / AICG).rPS we rICG, degişlilikde fotosensilizator we ICG-den alnan 1O2 bilen ABDA-nyň reaksiýa derejeleridir.APS we AICG, degişlilikde 808 nm fotosensilizatoryň we ICG-iň siňdirilişidir.
AFM ölçegleri Bruker Ölçeg nyşany AFM ulgamynda skaner re modeimini ulanyp, suwuk şertlerde geçirildi.Suwuk öýjükler bilen açyk gurluşy ulanyp, öýjükler iki gezek etanol bilen ýuwuldy we azot akymy bilen guradyldy.Guradylan öýjükleri mikroskopyň optiki kellesine salyň.Nusganyň bir damjasyny derrew suwuk howza salyň we steril bir gezek ulanylýan plastmassa şprisini we steril iňňäni ulanyp, kantilweriň üstünde goýuň.Anotherene bir damja gönüden-göni nusga goýulýar we optiki kellesi aşak düşende iki damja birleşýär we nusga bilen suwuk suw howdanynyň arasynda menisk emele gelýär.AFM ölçegleri SCANASYST-FLUID V şekilli nitrit kantilýeri (Bruker, gatylygy k = 0.7 N m-1, f0 = 120–180 kHz) ulanylyp geçirildi.
HPLC hromatogrammalary 2489 UV / Vis detektoryny ulanyp, feniks C18 sütüni (250 × 4,6 mm, 5 µm) bilen enjamlaşdyrylan Waters e2695 ulgamynda alyndy.Detektoryň tolkun uzynlygy 650 nm.A we B ykjam fazalary degişlilikde suw we metanol bolup, ykjam fazanyň akym tizligi 1,0 ml · min-1 boldy.Gradient (çözüji B) aşakdaky ýaly boldy: 0-dan 4 minuta çenli 100%, 5-den 30 minuta çenli 100% -den 50% -e çenli we 31-den 40 minuta çenli 100% -e täzeden düzüň.Magdan metanol bilen suwuň garyndy ergininde (50/50, göwrümi boýunça) 50 MM konsentrasiýasynda eritildi.Sanjymyň göwrümi 20 μl.
GPC barlaglary, iki sany akwagel-OH MIXED-H sütüni (2 × 300 × 7.5 mm, 8 µm) we ERC RefratoMax520 refraktiw indeks detektory bilen enjamlaşdyrylan Termo ULTIMATE 3000 guralynda ýazga alyndy.GPC sütüni 30 ° C-den 1 ml / min tizlik bilen suw bilen uzaldyldy.Magdan NP-leri PBS ergininde (pH = 7.4, 50 μM) eritildi, sanjym mukdary 20 μL.
Fotosuratlar elektrokimiki gurnama bilen ölçeldi (CHI-660B, Hytaý).Lazer açylanda we öçürilende optoelektron jogaplar (808 nm, 0,5 W / sm2) degişlilikde gara gutuda 0,5 V naprýa .eniýede ölçenildi.Adaty üç elektrodly öýjük L görnüşli aýna uglerod elektrody (GCE) bilen işleýän elektrod, adaty kalomel elektrody (SCE) salgylanma elektrody we platina diski hasaplaýjy elektrod hökmünde ulanyldy.Elektrolit hökmünde 0,1 M Na2SO4 ergini ulanyldy.
Adamyň döş rak keseli öýjük liniýasy MDA-MB-231 KeyGEN Biotec Co., LTD (Nanjing, Hytaý, katalog belgisi: KG033) satyn alyndy.Öýjükler 10% düwünçegiň irininiň (FBS), penisilliniň (100 μg / ml) we streptomisiniň (100 μg / ml) ergini bilen doldurylan Dulbecco-nyň Üýtgedilen bürgüdi orta (DMEM, ýokary glýukoza) monolaýerlerde ösdürilip ýetişdirildi.Cellshli öýjükler 5% CO2 bolan çygly atmosferada 37 ° C derejesinde ösdürilip ýetişdirildi.
MTT barlagy, VC (0,5 mM) bilen ýa-da bolmazdan, ýagty şöhlelenmäniň barlygynda we ýoklugynda RuDA we RuDA-NP-leriň sitotoksikligini kesgitlemek üçin ulanyldy.MDA-MB-231 rak keseli öýjükleri takmynan 1 x 105 öýjük / ml / guýy öýjük dykyzlygynda 96 guýy tarelkede ösdürilip ýetişdirildi we 5% CO2 we 95% howa atmosferasynda 12 sagatlap 37.0 ° C inkubasiýa edildi.Öýjüklere suwda erän RuDA we RuDA NP-ler goşuldy.12 sagat inkubasiýa edilenden soň, öýjükler 108 minut (300 J sm -2) tolkun uzynlygynda 0,5 W sm -2 lazer şöhlelenmesine sezewar boldular we 24 sagat garaňkyda inkubasiýa edildi.Öýjükler ýene 5 sagat MTT (5 mg / ml) bilen inkubasiýa edildi.Netijede, emele gelen gyrmyzy formazan kristallaryny eritmek üçin serişdäni DMSO (200 µl) üýtgediň.OD bahalary tolkun uzynlygy 570/630 nm bolan mikroplat okyjynyň kömegi bilen ölçenildi.Her nusga üçin IC50 bahasy, azyndan üç sany garaşsyz synagdan alnan doza jogap egrilerinden SPSS programma üpjünçiligi arkaly hasaplandy.
MDA-MB-231 öýjükleri RuDA we RuDA-NP bilen 50 μM konsentrasiýasynda bejerildi.12 sagat inkubasiýa edilenden soň, öýjükler tolkun uzynlygy 808 nm we 10 minut (300 J / cm2) güýji 0,5 W / cm2 bolan lazer bilen şöhlelendi.C witamini (Vc) toparynda öýjükler lazer şöhlelenmesinden öň 0,5 mM Vc bilen bejerildi.Öýjükler goşmaça 24 sagat garaňkyda saklandy, soňra kalsin AM we propidium ýod (20 μg / ml, 5 μl) bilen 30 minut boýaldy, soňra PBS (10 μl, pH 7.4) bilen ýuwuldy.reňklenen öýjükleriň şekilleri.